Kamis, 10 Oktober 2013

Uji Sterilitas

1.      Media Tioglikolat Cair à media ini digunakan untuk menumbuhkan bakteri

L-Sistin P                                                                                 0,5 g
Natrium klorida P                                                                   2,5 g
Glukosa P(C6H12OH2O)                                                         5,5 g
Agar P, granul (kadar air tidak lebih dari 15%)                        0,75 g
Ekstrak ragi P (larut dalam air)                                               5,0 g
Digesti pankreas kasein P                                                       15,0 g
Natrium tioglikolat Patau                                                       0,5 g
Asam tioglikolat P                                                                   0,3 ml
Larutan natrium resazurin P (1 dalam 1000) dibuat segar     1,0 ml
Air                                                                                           1000 ml
pH setelah disterilisasi 7,1 ± 0,2

Campur dan panaskan hingga larut. Atur pH larutan hingga setelah sterilisasi 7,1 ± 0,2 menggunakan natrium hidroksida 1 N. Jika perlu saring selagi panas menggunakan kertas saring. Tempatkan media dalam tabung yang sesuai, yang memberikan perbandingan permukaan dengan kedalaman media sedemikian rupa sehingga tidak lebih dari setengah bagian atas media yang mengalami perubahan warna sebagai indikasi masuknya oksigen pada akhir masa inkubasi. Sterilisasi dalam autoklaf. Jika lebih dari sepertiga bagian bagian atas terjadi warna merah muda, media diperbaiki satu kali dengan pemanasan di atas tangas air atau dalam uap yang mengalir bebas hingga warna merah muda hilang. Media siap digunakan jika tidak lebih dari sepersepuluh bagian atas media berwarna merah muda. Gunakan media tioglikolat cair untuk inkubasi dalam kondisi aerob.

2.       Media Tioglikolat Alternatif (untuk alat yang mempunyai lumen kecil) à media ini digunakan untuk menumbhkan bakteri terutama pada alat yang mempunyai lumen kecil
L-Sistin P                                                                                 0,5 g
Natrium klorida P                                                                   2,5 g
Glukosa P(C6H12OH2O)                                                         5,5 g
Ekstrak ragi P (larut dalam air)                                               5,0 g
Digesti pankreas kasein P                                                       15,0 g
Natrium tioglikolat Patau                                                        0,5 ml
Asam tioglikolat P                                                                   0,5 ml
Air                                                                                           1000 ml
pH setelah disterilisasi 7,1 ± 0,2

Panaskan dalam wadah yang sesuai hingga larut. Campur dan jika perlu, atur pH larutan hingga setelah disterilisasi 7,1 ± 0,2 menggunakan natrium hidroksida 1 N. Saring jika perlu, tempatkan dalam tabung yang sesuai dan sterilisasi dengan uap air. Media dibuat segar atau dipanaskan di tangas uap dan didinginkan saat digunakan. Tidak boleh dipanaskan kembali. Gunakan media tioglikolat alternatif dengan cara yang menjamin kondisi anaerob selama masa inkubasi.

3.      Soybean – Casein Digest Medium à media ini digunakan untuk menumbuhkan jamur

Digesti pankreas kasein P                                                       17,0 g
Digesti peptik tepung kasein                                                    3,0 g
Natrium klorida P                                                                   5,0 g
Kalium fosfat dibasa P                                                            2,5 g
Glukosa P(C6H12OH2O)                                                         2,5 g
Air                                                                                           1000 ml
pH setelah disterilisasi 7,3 ± 0,2

           
Larutkan semua bahan padat dalam air, hangatkan hingga larut. Dinginkan larutan hingga suhu kamar, dan jika perlu atur pH larutan hingga setelah sterilisasi 7,3 ± 0,2
Menggunakan natrium hidroksida 1 N. Saring jika perlu, dan bagikan dalam tabung yang sesuai. Sterilisasi dengan uap air.
Gunakan Soybean – Casein Digest Medium untuk inkubasi dalam kondisi aerob.

Catatan : Jika digunakan Media Tioglikolat Cair dan Soybean – Casein Digest Medium dalam prosedur uji inokulasi langsung ke dalam media uji untuk menetapkan spesimen yang mengandung antibiotik golongan penisilin atau sefalosporin, secara aseptik tambahkan sejumlah penisilinase yang diperlukan dengan menggunakan sediaan penisilinase yang sebelumnya telah diuji daya pernginaktif penisilin atau sefalosporin. Atau tetapkan jumlah penisilinase yang diperlukan dengan menambahkannya ke dalam tabung media Media Tioglikolat Cair dan sejumlah antibiotik penisilin atau sefalosporin sejumlah antibiotik dalam spesimen uji inokulasi media dengan 1 ml pengenceran (1 dalam 1000) biakan 18 jam sampai 24 jam pada suhu 300 sampai 380, pada saat ini harus teramati pertumbuhan antimikroba yang spesifik. Lakukan uji konfirmasi di daerah yang benar-benar terpisah dari tempat uji sterilisasi.


Sumber : Farmakope Indonesia Edisi IV hal 856

Tidak ada komentar:

Posting Komentar